Il n'est pas simple de différencier mâles et femelles. Seul un oeil exercé et quelques petites astuces peuvent nous y aider.

La plus grande différence est évidemment le chant. Le mâle nous fait entendre ce son mélodieux propre à cette espèce. Quant à la femelle, elle ne fait que pousser des cris. Mais évidemment, ce seul facteur n'est pas suffisant car le rossignol ne chante pas sur commande. Voici donc d'autres petites astuces.

Généralement, le dessous de la queue d'un mâle a les extrémités avec un noir plus étendus. C'est sans doute le meilleur moyen pour sexer. Déjà, lors de leur plumage juvénile, cette différence est présente.

La couleur autour de l'oeil est souvent plus intense et avec une couleur jaune plus prononçée chez les sujets masculins. Mais il est difficile de comparer si l'oiseau est seul. Cela vaut donc uniquement pour le cas où plusieurs rossignols peuvent être comparés.